МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ПРИКАЗ
от 30 ноября 2020 года N 716
Об утверждении Методики производства молекулярно-генетического исследования генно-инженерно-модифицированных растений, используемых для разведения и (или) выращивания на территории Российской Федерации, Методики производства экспертиз (исследований) биологической безопасности генно-инженерно- модифицированных растений, используемых для разведения и (или) выращивания на территории Российской Федерации
В соответствии с пунктом 13 Правил государственной регистрации генно-инженерно-модифицированных организмов, предназначенных для выпуска в окружающую среду, а также продукции, полученной с применением таких организмов или содержащей такие организмы, включая указанную продукцию, ввозимую на территорию Российской Федерации, утвержденных постановлением Правительства Российской Федерации от 23 сентября 2013 г. N 839 (Собрание законодательства Российской Федерации, 2013, N 39, ст.4991),
приказываю:
1. Утвердить:
Методику производства молекулярно-генетического исследования генно-инженерно-модифицированных растений, используемых для разведения и (или) выращивания на территории Российской Федерации, согласно приложению N 1 к настоящему приказу;
Методику производства экспертиз (исследований) биологической безопасности генно-инженерно-модифицированных растений, используемых для разведения и (или) выращивания на территории Российской Федерации, согласно приложению N 2 к настоящему приказу.
2. Настоящий приказ вступает в силу с 1 сентября 2021 г. и действует до 1 сентября 2027 г.
Министр
Д.Н.Патрушев
Зарегистрировано
в Министерстве юстиции
Российской Федерации
22 января 2021 года,
регистрационный N 62183
Приложение N 1
к приказу Минсельхоза России
от 30 ноября 2020 года N 716
Методика производства молекулярно-генетического исследования генно-инженерно-модифицированных растений, используемых для разведения и (или) выращивания на территории Российской Федерации
1. Настоящая Методика устанавливает порядок проведения молекулярно-генетического исследования генно-инженерно-модифицированных растений, используемых для разведения и (или) выращивания на территории Российской Федерации (далее - исследование, ГИМР соответственно).
2. Исследование проводится организацией (испытательной лабораторией), аккредитованной в национальной системе аккредитации в области аккредитации, соответствующей исследованиям, указанным в настоящей Методике.
3. Результаты исследования ГИМР оформляются заключением о результатах исследования, составляемым на основании протоколов испытаний, которое должно содержать следующие сведения:
наименование заключения;
полное наименование и адрес в пределах места нахождения организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение исследования;
наименование ГИМР с указанием его таксономического статуса;
полное наименование, адрес в пределах места нахождения, идентификационный номер налогоплательщика юридического лица, осуществляющего на территории Российской Федерации генно-инженерную деятельность в целях создания ГИМР (далее - заявитель);
полное наименование и адрес в пределах места нахождения юридического лица либо фамилия, имя, отчество (при наличии), адрес места жительства индивидуального предпринимателя - изготовителя образцов ГИМР, представленных для проведения исследования;
вид предполагаемого целевого использования ГИМР;
сведения о трансформационном событии в виде кода, сформированного согласно Общероссийскому классификатору трансформационных событий;
регистрационный номер свидетельства о государственной регистрации ГИМР, предназначенного (предназначенных) для выпуска в окружающую среду, на основе которого (которых) создано ГИМР, в отношении которого проведено исследование (в случае если ГИМР создано на основе иного (иных) ГИМР), либо информацию об отсутствии такого свидетельства;
регистрационный номер свидетельства о государственной регистрации ГИМР для иного целевого использования (при наличии) либо информацию об отсутствии такого свидетельства;
сведения о регистрации ГИМР за рубежом (при наличии);
оценку полноты представленных заявителем документов и данных;
краткое содержание документов и данных, представленных заявителем;
описание представленных заявителем для проведения исследования образцов ГИМР и исходного организма-реципиента с указанием их количества, а также оценку их пригодности для проведения исследования;
перечень исследований ГИМР с указанием их результатов;
выводы о результатах исследования: о молекулярно-генетической структуре ГИМР, об отсутствии или наличии незаявленных генетических последовательностей в геноме ГИМР; об эффективности метода идентификации ГИМР, сведения о соответствии генетической модификации природным (естественным) процессам;
фамилии, имена, отчества (при наличии) лиц, проводивших исследование, ученые степени, ученые звания (при наличии), адрес места их работы и должности;
дату и номер заключения;
подпись руководителя организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение исследования.
4. К заключению о результатах исследования ГИМР должны прилагаться протоколы испытаний, на основании которых оно составлено, подписанные лицами, проводившими исследования.
5. В случае если заявителем не представлены документы и данные, предусмотренные пунктом 6 настоящей Методики, и (или) необходимые образцы, пригодные для проведения исследований, исследование не проводится. Заявителю должен быть выдан мотивированный отказ в проведении исследования, подписанный руководителем организации (испытательной лаборатории), аккредитованной в национальной системе аккредитации в области аккредитации, соответствующей исследованиям, указанным в настоящей Методике, в которую обратился заявитель для проведения исследования.
6. В рамках исследования ГИМР осуществляется рассмотрение представленных заявителем документов и данных:
а) наименования ГИМР с указанием его таксономического статуса; полного наименования и адреса в пределах места нахождения, идентификационного номера налогоплательщика заявителя; полного наименования и адреса в пределах места нахождения юридического лица либо фамилии, имени, отчества (при наличии), адреса места жительства индивидуального предпринимателя - изготовителя образцов ГИМР, представленных для проведения исследования; вида предполагаемого целевого использования ГИМР; регистрационного номера свидетельства о государственной регистрации ГИМР, предназначенного (предназначенных) для выпуска в окружающую среду, на основе которого (которых) создано ГИМР, в отношении которого проведено исследование (в случае если ГИМР создано на основе иного (иных) ГИМР) либо информации об отсутствии такого свидетельства; регистрационного номера свидетельства о государственной регистрации ГИМР для иного целевого использования (при наличии) либо информации об отсутствии такого свидетельства;
б) сведений об исходном организме-реципиенте (таксономическая характеристика: род; родственные виды, в том числе виды вредных организмов, способных нанести вред растениям или продукции растительного происхождения; морфологическое описание; природные токсины; генотип; скрещиваемость с родственными видами, в том числе в предполагаемых районах выращивания ГИМР; источник получения (полное наименование и адрес в пределах места нахождения юридического лица либо фамилия, имя, отчество (при наличии), адрес места жительства физического лица - владельца исходного организма-реципиента); ссылка на используемые определители);
________________
Пункт 6 статьи 2 федерального закона от 21 июля 2014 г. N 206-ФЗ "О карантине растений" (Собрание законодательства Российской Федерации, 2014, N 30, ст.4207).
в) сведений о трансформационном событии в виде кода, сформированного согласно Общероссийскому классификатору трансформационных событий;
г) описания структуры генетической конструкции (внесенной или удаленной) и места ее локализации, характеристик встроенных или измененных генов;
д) информации о генетической модификации: описания метода модификации, структуры вектора, структуры вставки, расположения рекомбинантной дезоксирибонуклеиновой кислоты (далее - ДНК) (хромосома, плазмида, мобильные элементы), включая фланкирующие последовательности, включения в состав мобильных генетических элементов;
е) описания последовательностей ДНК и методов, использованных для введения этих последовательностей в геном растения, включая сведения о структурном соответствии интегрированного гена природному гену; числе вставок (числе генетических локусов); числе копий гетерологичных ДНК в каждом генетическом локусе; месте интеграции экзогенной ДНК (целостности вставки); отсутствии или наличии гетерологичной ДНК вне границ т-ДНК и (или) вне клонируемой вставки; селективных маркерных и (или) репортерных генах; данных о молекулярной структуре вставки, необходимых для ее идентификации в структуре интегрированной ДНК, в том числе о бордер-специфичных праймерах (при наличии таких праймеров);
ж) информации об организмах - донорах вносимых генов (с указанием группы патогенности при наличии);
з) описания методики, позволяющей идентифицировать генетическую модификацию с описанием нуклеотидных последовательностей, используемых праймеров, зондов и условий полимеразной цепной реакции (далее - ПЦР);
и) данных секвенирования вставки ГИМР и бордерных последовательностей, не менее 100 нуклеотидов по флангам генома реципиента (при наличии).
Заявителем для исследования представляются образцы ГИМР и исходного организма-реципиента.
7. В рамках исследования должны быть проведены следующие испытания ГИМР и исходного организма-реципиента:
а) проверка (валидация) методики идентификации ГИМР, в том числе оценка чувствительности и специфичности данной методики в соответствии с критериями эффективности, указанными в приложении к настоящей Методике;
б) подтверждение присутствия (отсутствия) заявленной генетической модификации в геноме ГИМР;
в) подтверждение присутствия (отсутствия) незаявленных генетических последовательностей в геноме ГИМР.
Приложение
к Методике производства молекулярно-
генетического исследования
генно-инженерно-модифицированных
растений, используемых для
разведения и (или) выращивания
на территории Российской Федерации,
утвержденной приказом
Минсельхоза России
от 30 ноября 2020 года N 716
Критерии эффективности методики идентификации ГИМР
N | Характеристика | Описание характеристики | Критерий | Методы оценки критерия |
1 | Специфичность ПЦР | Способность ПЦР-тест-системы выявлять только целевую ДНК | ПЦР-тест-система должна выявлять целевую ДНК. ПЦР-тест-система не должна давать ложноположительных результатов, в том числе выявлять ДНК близкородственных и неродственных биологических видов, в 100% проводимых исследований | Для оценки специфичности используются контрольные панели образцов. В состав панели должны входить образцы, содержащие целевую ДНК и не содержащие целевую ДНК |
2 | Чувствительность ПЦР | Наименьшее содержание копий целевой ДНК, которое может быть определено с использованием данной ПЦР-методики в зависимости от свойств используемых праймеров и зондов | Чувствительность должна быть не ниже 100 копий целевой ДНК в одной ПЦР-реакции | Проводятся исследования ряда десятикратных разведений целевой ДНК с известной концентрацией в двух повторах каждое. Определяется максимальное разведение, при котором ДНК воспроизводимо выявляется (в двух повторах) |
3 | Эффективность ПЦР | Прирост матрицы на каждом цикле амплификации | Эффективность ПЦР должна быть не ниже 90%. | Для оценки эффективности ПЦР проводится амплификация с рядом десятикратных разведений целевой ДНК (пункт 2 настоящей таблицы) в двух повторах каждое. |
4 | Предел обнаружения ПЦР-тест-системы (LOD) | Минимальное количество биологического искомого объекта в исследуемом образце, которое может достоверно обнаружить данный метод | Чем меньше искомого биологического объекта способен выявить метод, тем выше его чувствительность. Предел обнаружения ПЦР-тест-системы (LOD) должен составлять не более 0,1% | Готовится ряд модельных образцов с разным содержанием целевой матрицы. |
5 | Предел количественного определения (LOQ) | Наименьшее количество (концентрация) вещества в образце, которое может быть количественно оценено с использованием методики с требуемой правильностью и внутрилабораторной прецизионностью | Предел должен быть не более 0,1%. | Исследуется 10 повторов 0,1% ГИМР-стандарта по ПЦР-методике. |
6 | Аналитическая область (dynamic range) | Интервал определяемых аналитических характеристик, в котором получаемые результаты имеют приемлемый уровень правильности и прецизионности, приемлем диапазон 0,1% - 5% | Диапазон 0,1% - 5% экспериментальных данных, должен удовлетворять линейной модели (пункт 7 настоящей таблицы) | Проводятся исследования образцов с различным содержанием ГИМР. |
7 | Линейность | Наличие линейной зависимости аналитического сигнала в анализируемой пробе в пределах аналитической области методики. Оценивается как R2 коэффициент корреляции, определяющий верность модели линейной зависимости Ct от логарифма концентрации калибровочных образцов | R2 коэффициент для калибровочных образцов должен быть не менее 0,98% | Исследуется в двух повторах 0,1%, 1,0% и 5% калибровочные ГИМР-стандарты по ПЦР-методике. |
8 | Правильность | Отклонение среднего результата определений от значения, принимаемого за истинное | Методика дает корректные результаты, если значения, принимаемые за истинные, лежат внутри доверительных интервалов соответствующих средних результатов анализов, полученных экспериментально по данной методике | Готовятся образцы из калибровочных стандартов 0,1%, 1,0% и 5% с добавлением матриц различного происхождения, для чего стандарты смешиваются с другими ингредиентами (сухим молоком, мясным фаршем, рыбной мукой). Исследуются образцы по ПЦР-методике в двух повторах. |
Приложение N 2
к приказу Минсельхоза России
от 30 ноября 2020 года N 716
Методика производства экспертиз (исследований) биологической безопасности генно-инженерно-модифицированных растений, используемых для разведения и (или) выращивания на территории Российской Федерации
I. Общие положения
1. Настоящая Методика устанавливает порядок проведения экспертиз (исследований) биологической безопасности генно-инженерно-модифицированных растений, используемых для разведения и (или) выращивания на территории Российской Федерации (далее - экспертиза, ГИМР соответственно).
2. Экспертиза проводится организацией (испытательной лабораторией), аккредитованной в национальной системе аккредитации в области аккредитации, соответствующей исследованиям, указанным в настоящей Методике.
3. Результаты экспертизы оформляются заключением о результатах экспертизы, составленным на основании протоколов исследований ГИМР, которое должно содержать следующие сведения:
наименование заключения;
полное наименование и адрес в пределах места нахождения организации (испытательной лаборатории), осуществившей проведение экспертизы;
наименование ГИМР с указанием его таксономического статуса;
полное наименование, адрес в пределах места нахождения, идентификационный номер налогоплательщика юридического лица, осуществляющего на территории Российской Федерации генно-инженерную деятельность в целях создания ГИМР (далее - заявитель);
полное наименование и адрес в пределах места нахождения юридического лица либо фамилия, имя, отчество (при наличии), адрес места жительства индивидуального предпринимателя - изготовителя образцов ГИМР, представленных на экспертизу;
